動物ELISA試劑盒對樣本有什么要求？

　　動物ELISA試劑盒靈敏度高，穩定性強，操作簡單，是一款可以讓您放心選擇的產品。

 

　　動物ELISA試劑盒樣本要求如下：

 

　　1.樣本類型和采集

 

　　血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置0.5-2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

 

　　血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

 

　　組織勻漿：用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

 

　　細胞裂解液:吸棄培養液，用PBS（0.01M，pH7.4）將細胞洗一遍。用細胞刮刮下細胞（不能用胰酶和EDTA處理），加入2-5mLPBS（0.01M，pH7.4）。懸浮細胞可省略。收集細胞懸液，4℃1000×g離心10min，棄去培養基，用預冷的PBS潤洗3次。加入適量的預冷PBS或非變性細胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細胞,通常6孔板一個孔的細胞量需要150-250μLPBS重懸。將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，反復凍融3次，使細胞充分裂解,也可將樣品進行超聲破碎，以達到裂解的目的。4℃10000×g離心10min，除去細胞碎片，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

 

　　細胞培養物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

 

　　2.樣本保存和穩定性

 

　　樣本在2-8℃條件下，可以儲存72h，在-20℃或-80℃可以儲存6個月及以上。樣本收集后，不是一次檢測完，請按一次用量分裝凍存，避免反復凍融。